药物敏感试验简称药敏试验（或耐药试验）。其目的是了解病原微生物对各种抗生素的敏感（或耐受）程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。药敏试验方法包括:稀释法(包括琼脂稀释法和肉汤稀释法)、纸片扩散法、梯度扩散法和自动化仪器法。稀释法是检测抗菌药物敏感性的定量试验方法，为药敏试验的参考方法。

    作为第三方检测中心，中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，可出具国家认可的药敏试验报告。

    药敏试验琼脂稀释法

    1、制备初始接种菌悬液

    被测菌株和质控菌株配制0.5麦氏浊度单位的菌悬液，作为初始接种物，并按一定顺序放入试管架。

    2、稀释接种菌悬液

    用无菌肉汤或生理盐水将初始接种物1:10稀释，混匀后将稀释后的接种物按排列顺序分别吸取0.1mL至96孔微孔板。

    3、 接种菌悬液

    a)标记含药 MHA平皿接种点方向。

    b)采用多点接种仪或标准接种环等将稀释后的接种物按顺序分别接种1μL~3μL至无抗菌药物的生长对照平皿、含梯度药MHA平皿表面(从低浓度到高浓度)和第二块生长对照平皿。

    c)平皿室温放置至菌点干燥，但放置时间不超过 30min。

    4、 孵育

    置于35 ℃±2 ℃空气环境中孵育16 h~20h。苛养菌的药敏试验平皿孵育条件和时间按规定。

    5、结果判读

    将平皿置于黑色、无反光背景上读取结果。以抑制细菌肉眼可见生长的最低浓度为MIC。

    药敏试验肉汤稀释法

    1、制备初始接种菌悬液

    被测菌株和相应质控菌株如大肠埃希菌ATCC25922配制0.5麦氏浊度单位的菌悬液，作为初始接种物菌悬液。

    2、稀释接种菌悬液

    用制备的CAMHB肉汤将初始接种物1:100倍稀释(微量肉汤稀释法)或1:150倍(宏量肉汤稀释法)稀释，混匀。

    3、接种菌悬液

    a)将稀释后的接种物按顺序依次吸取 0.05m,至1步骤制备的含等量药 96孔微孔板或吸取1mL,至2步骤制备的含等量药试管中。

    b)稀释菌液在15min内接种完毕。

    c)同时将稀释后的接种物接种至不含抗菌药物的非选择性琼脂平皿，以检测接种菌悬液的纯度。

    d)微量肉汤稀释法:将稀释后的菌悬液接种至不含抗菌药物微孔作为生长对照，同时设置不加接种菌悬液的含药孔。

    e)宏量肉汤稀释法:设置每一株菌的初始接种物的不含药的生长对照管。

    4、 孵育

    接种好的菌液和抗菌药物混合液置于35℃±2℃孵箱中孵育16h~20 h。苛养菌的药敏试验平皿孵育条件和时间按规定。

    5、接种菌悬液的菌落计数

    每一批试验应同时进行接种菌悬液的菌落计数,以保证微量肉汤稀释法和宏量肉汤稀释法的最终接种菌悬液浓度。

    6、结果判读

    a)以抑制细菌肉眼可见生长的最低浓度为 MIC。

    b)根据生长对照孔/管菌液生长量判定生长终点。革兰阳性球菌检测氣霉素、克林霉素、红霉素、利奈唑胺和四环素时，易出现拖尾现象，读取拖尾现象开始的第一个孔的 MIC值，忽略微小菌膜。若存在多孔跳孔现象，需重新检测。