药物结构确证是确保药物安全、有效和质量可控的重要环节。药物结构确证的目的是为了准确识别药物的化学结构和立体构型，以确保药物的安全性、有效性和一致性。这些要求确保了药物从原料合成到最终产品的整个过程中，其结构和质量得到了充分的确认和控制。原料药的结构确证，属于药物申报的必需内容。

    中科检测实验室可对原料药、中间体、化合物等完成结构确证项目，为客户总结分析报告，助力药企及科研机构结构确证工作的进行，完成对药品的申报。

    化学药物进行结构确证的一般顺序

    单一组分化合物通常是定向合成、天然产物提取、发酵提取或半制备等方式制备得到，通过液相或气相等检测手段评估纯度（原料药纯度通常≥99.0%；杂质纯度通常≥90.0%）后，主要通过核磁共振氢谱（1H-NMR）、光谱及常规质谱（MS）等方法，基于合成机理推断平面结构；如合成机理不明确，采用提取方式获得，或氢谱及质谱等常规方法对化合物结构判断的信息作用不大，则需要投入更多确证方法来辅助结构判断，如借助碳谱（13C-NMR），二维核磁等来确证；在解析得到平面结构后，如判断存在立体构型，应采用针对立体结构相应的研究手段，如NOESY、圆二色谱（CD）、单晶衍射等进行确证。

    化学药物进行结构确证的研究手段

    化合物结构初步确证后，按照相关指导原则，笔者根据化合物类别，对原料药（新化学实体、已知化合物）、起始物料/中间体/杂质（新化合物、已知化合物）结构确证的相关研究内容列表整理如下。

    表1 不同类别化合物的结构确证方法判断

    化学药物结构确证方法介绍

    1、高分辨质谱（HRMS）/质谱（MS）

    与常规质谱相比，高分辨质谱（HRMS）测得化合物的分子量可精确至小数点后第四位，常用于辅助确定化合物的分子质量和和分子式，前提是通过核磁共振波谱已初步确定化合物结构。某些情况下，质谱可以起到结构确证的关键作用。

    2、 元素分析

    元素分析对化合物中的各元素进行含量测定，确定各元素的百分含量。

    针对各元素的特点，元素分析可选择的方法较为多样。碳、氢、氮元素检测通常采用燃烧分解法；含卤素或硫的化合物，采用氧瓶燃烧-滴定法（中国药典2020年版四部通则0703）；金属元素可采用电感耦合等离子发射光谱法（ICP-OES）；磷元素可采用酸分解-比色法等。

    3、 一维核磁共振波谱

    取化合物2mg~10mg装入核磁管，用合适的氘代试剂进行溶解，用核磁共振波谱仪（频率通常400M~800M）进行检测，内标物为四甲基硅烷（TMS）。

    4、 二维核磁共振波谱；

    二维核磁共振波谱是对平面结构进行确证的关键。常用的为：HMBC（检出1H异核多键相干技术）、HSQC（检出1H异核单量子相干技术）、COSY（同核位移相关谱）、NOESY（核极化效应相关谱）。

    5、圆二色谱（CD）

    圆二色谱（CD）是用于推断非对称分子的构型和构象的一种旋光光谱，可用于确证化合物的绝对构型。

    6、单晶X-射线衍射（XRSD）

    单晶X-射线衍射（XRSD）也是确定绝对构型的常用方法，可测定晶态分子的晶胞参数、晶系、空间群，可提供一个化合物在晶态中所具有原子的精确空间位置。该技术主要涉及单晶培养和检测。晶体培养难度较大，需不断尝试且有足够耐心。

    7、其他结构确证技术

    除上述结构确证方法外，还有很多其他的结构确证技术，如红外、紫外、拉曼光谱、热重分析（TG）、差示扫描量热法（DSC）、旋光光谱等。

    红外光谱、热重分析（TG）、差示扫描量热法（DSC）、偏光显微镜法等对化合物晶型的判断也可起到辅助作用。